N C

N末端与C末端测序

MALDI自上而下表征

使用MALDI完整蛋白质测序,无需蛋白酶解,即可在1分钟内通过完整质量测量鉴定您的蛋白质,并确认N末端与C末端修饰,包括截短与突变。

借助专有闪点检测器的高质量范围,使用布鲁克MALDI-TOF仪器能对您的治疗药物(包括抗体)进行完整质量测量。
自上而下测序(TDS)大幅拓展了布鲁克质谱仪的分析范围。自上而下测序甚至可以直接获取大型未消化蛋白质的序列信息。它可以有效检测和定位化学修饰、翻译后修饰、突变和蛋白质异形体,使用经典的胰蛋白消化则难以检测这些信息。自上而下测序还能提供靶向蛋白质末端表征,并显著提高了埃德曼降解法的预期能力
所有自上而下测序方法均利用裂解技术,直接在肽序列中的激发位点产生肽键裂变。这样可以提供相对便于解释的常规序列阶梯。

NIST LC ISD ST

蛋白质N末端与C末端测序

得益于在MALDI源中使用源内裂解(ISD),MALDI-TDS甚至可以有效读取大型蛋白质(> 40 kDa)的N末端和C末端序列。MALDI ISD能够产生单电荷肽,极大地简化序列读取。这些单电荷肽可用于鉴定未知蛋白质,指定融合蛋白或突变位点的详细结构。使用MALDI-TDS甚至可以分析复杂的聚乙二醇化治疗性蛋白质和抗体(完整和亚基)。MALDI-TDS为传统的埃德曼降解能力提供了增强和补充,既适用于N末端阻断蛋白质,也能提供C末端信息。此外,使用快速、可靠的专用TDS软件可以在数分钟内完成整个方法,从制备样品、采集光谱和处理光谱,到生成带注释的ISD光谱。系统将自动生成PDF报告,以文件方式提供分析结果。

简单来说,MALDI TDS的优势包括:

  • 生成序列信息,甚至从大型未消化蛋白质也能如此
  • 快速N末端和C末端表征
  • 提供超出埃德曼降解法的增值功能

 

 

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“分秒间完成自上而下蛋白质测序”