Resonancia de plasmón de superficie

Resonancia de plasmón de superficie para un análisis de alto rendimiento

Análisis de SPR de alto rendimiento para la caracterización en tiempo real y sin etiquetas de las interacciones moleculares
Resonancia de plasmón de superficie

Detección de interacciones moleculares de alto rendimiento

La resonancia de plasmón de superficie (SPR) es una tecnología de detección óptica y sin etiquetas para la supervisión en tiempo real de las interacciones de unión entre dos o más moléculas. El rendimiento, la flexibilidad y la sensibilidad de la plataforma de SPR ofrece a los investigadores la posibilidad de caracterizar las interacciones biomoleculares en cualquier estudio de unión molecular. Se puede estudiar una amplia gama de moléculas: desde iones, hasta proteínas y virus pasando por fragmentos y pequeñas moléculas. La tecnología de SPR proporciona datos biofísicos como la afinidad, la cinética y la termodinámica.

 

Los biosensores analíticos basados en SPR son herramientas valiosas en la caracterización de las interacciones moleculares. La combinación de tres elementos (el detector, la superficie del sensor y el sistema de entrega de muestras) son esenciales para poder realizar el experimento.

Resonancia de plasmón de superficie

Detección óptica en tiempo real y sin etiquetas

Las interacciones de unión entre una molécula en la superficie del sensor (ligando) y su compañero de unión en la solución (analito) son monitorizadas en tiempo real por SPR. 

La SPR utiliza un tipo de reflexión interna total y causa una reducción de la intensidad de la luz reflejada en un ángulo específico desde el lado de cristal de la superficie del sensor.  A medida que las moléculas se unen, el índice de refracción cerca de la superficie cambia y produce un cambio en el ángulo de la intensidad reflejada mínima. El cambio de ángulo es proporcional a la masa del material ligado. La salida típica es un sensorgrama que monitoriza el cambio de ángulo en función del tiempo.

Resonancia de plasmón de superficie

SPR+ Detection

El Sierra SPR-24/32 Pro emplea la detección de imágenes por resonancia de plasmón de superficie conocida como SPR+. SPR+ permite obtener imágenes de conjuntos bidimensionales con un nivel de sensibilidad de detección que suele estar restringido a conjuntos lineales. SPR+ obtiene su alta sensibilidad combinando la imagenología SPR tradicional con un láser de alta intensidad y escaneado óptico de alta velocidad. La intensidad de la fuente de luz permite usar cámaras de alta velocidad que, a su vez, permiten realizar más mediciones de resonancia por escaneo. El resultado es un menor ruido RMS y una mayor precisión al medir pequeños cambios de respuesta.

Resonancia de plasmón de superficie

Los sensores son fáciles de usar y reducen la variabilidad de los ensayos

Los sensores utilizados en los sistemas Sierra SPR son prismas chapados en oro montados en cartuchos fáciles de manejar. El diseño hace que la instalación sea sencilla y elimina la variación de ensayos relacionados con el usuario. La superficie dorada, necesaria para la SPR, puede revestirse con una monocapa autoensamblada para bloquear la unión no específica de las proteínas y facilitar la unión de las moléculas a la superficie. Al haber una mayor variedad de productos químicos de unión de superficie, existe también una mayor utilidad de los biosensores analíticos para una amplia gama de aplicaciones.

 

Resonancia de plasmón de superficie

Nuevos microfluidos de flujo continuo

La entrega de muestras a la superficie del sensor a través de un dispositivo microfluídico de flujo continuo genera las medidas de unión más precisas. Para la entrega de muestras reproducibles, el sistema Sierra SPR-24/32 Pro utiliza la tecnología patentada de aislamiento hidrodinámico (HI). El HI es un método para presentar volúmenes de fluidos pequeños pero muy discretos a lugares aislados en una superficie bidimensional dentro de una celda de flujo bajo flujo laminar. El direccionamiento de fluidos específicos de la posición dentro de la celda de flujo se facilita combinando los componentes del enfoque hidrodinámico con la evacuación en lugares específicos. El proceso no requiere usar barreras físicas dentro de la celda de flujo o de válvulas mecánicas para controlar las trayectorias del movimiento del fluido; lo que permite una multiplexación de alto rendimiento o la construcción de conjuntos bidimensionales con puntos de detección direccionables individualmente.

Resonancia de plasmón de superficie

Aplicaciones de la resonancia de plasmón de superficie

El Sierra SPR Pro-Series es un biosensor analítico de alto rendimiento para la caracterización en tiempo real y sin etiquetas de las interacciones moleculares en una amplia gama de aplicaciones.

Investigation of condition-dependent binding using frame inject
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Detección y caracterización de pequeñas moléculas que se unen a proteínas objetivo

El análisis en tiempo real y sin etiquetas (RT-LF) por detección de SPR es una herramienta valiosa para la caracterización biofísica de medicamentos de pequeñas moléculas y nuevos candidatos a medicamentos..


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