SENTERRA II head

Microscopia Raman confocal

¿Qué significa confocalidad?

En la microscopia óptica, confocalidad significa que tanto el punto de iluminación de una muestra como el agujero estenopeico dentro de la trayectoria del haz comparten sus focos. En términos prácticos, en lugar de la muestra completa, solo una pequeña porción está iluminada por una fuente de luz en forma de punto, mientras que el agujero estenopeico bloquea la luz desenfocada para aumentar el contraste y la profundidad de campo.

 

¿Qué es la microscopia Raman confocal?

Este principio también puede aplicarse a la espectroscopia Raman, que aumenta la resolución espacial a lo largo del eje x,y- (resolución espacial) y el eje z (profundidad), permitiendo la creación de perfiles de profundidad. Sin embargo, los microscopios Raman pueden diferir en su diseño confocal.

Traditional confocal light microscope
Pseudoconfocal hyprid

El verdadero diseño confocal

La mayor ventaja de un verdadero microscopio Raman confocal es que no depende de la resolución espacial y espectral. Esto se consigue colocando un agujero estenopeico delante de ranura de entrada del espectrómetro. El agujero estenopeico controla el grado de confocalidad, mientras que la ranura de entrada determina la resolución espectral del espectrómetro. La desventaja de este diseño es la dificultad de alinear óptimamente ambas aberturas para garantizar un rendimiento que sea óptimo y constante a la vez.

 

Diseño pseudoconfocal

Se trata de una configuración simplificada en la cual la resolución espacial se determina por una combinación de la ranura de entrada en una dirección y la resolución espacial del detector CCD en la dirección ortogonal. Al limitar el espectrógrafo, esta configuración tiene un rendimiento en cuanto a resolución espacial inferior al diseño confocal auténtico, pero su rendimiento global es mucho mejor al reducir el número de ópticas.

 

Diseño confocal híbrido (FlexFocus)

Puesto que ambos diseños ofrecen claras ventajas, un microscopio Raman puede equiparse con una matriz híbrida que incluye un conjunto de agujeros estenopeicos y ranuras que actúan como una abertura confocal o como una entrada de espectrógrafo. Este diseño híbrido combina las ventajas de ambos diseños y permite un cambio rápido entre mediciones confocales verdaderas y mediciones de alto rendimiento.

Spectra50slit