LC-MALDI 的集成样品制备

spotOn®

用于靶板准备和组分收集的集成系统,填补了 LC 分离和 MALDI-TOF 分析之间的各自独立

从进样瓶到样品靶

节省时间和金钱

spotOn-web

亮点

spotOn

最大化数据,最大限度地减少 LC-MALDI 样品制备中的压力

集成系统
Compass HyStar 5.0 软件控制 LC 组件。spotOn® 引导操作员逐步设置相关的点样任务。
直观的操作
实时在线信息使用户轻松监控分离和 MALDI 靶板制备的所有步骤。
可重复的点样
双独立同心针( DICNTM )和点样针通过气压和溶剂流在内部和外部清洁,以防止残留。
低氧环境点样
点样器可配氮隔离选项防止样品氧化。

特点

spotOn

方便的台式解决方案

spotOn® 可方便地安装到桌面上,在 LC-MALDI 工作流程中使靶板准备这一步骤更快、更容易,使所有样本组分和 MALDI 基质达到最佳结晶,从而提高数据质量并加快数据收集。

预定义方法和针对所有 spotOn® 配件的详细查询,包括 MALDI 靶板和基质解决方案、减少实验错误和不受操作员经验影响提升连续运行时的重现性。

布鲁克 spotOn® 系统可轻松连接到纳流或毛细管-LC 系统,并可将 LC 组分应用于可重复使用的 384 或 1536 位 MALDI 靶板。洗脱剂量可以根据组分时间( 体积 )或所需的组分数,邻近的校准标样可以包含在靶板准备中,以提高质量精度。MALDI 基质可同时等分或设定的干燥时间后施加,从而形成 MALDI 分析的均匀样品靶点。无论是使用 nanoElute® LC 系统还是其他品牌仪器,LC 组分可简单地被收集在微孔板中以进行后续分析。

 

nanoElute LC 和 spotOn® 状态显示在一个软件界面中
直观的图形用户界面中的软件操作向导,可方便地设置 LC-MALDI 分析

优势

spotOn

将 LC 片段保留在 MALDI 板上,进行分离后的更深入分析

通过使用预制的待使用 MALDI 靶板,您可以详细地分析样品。全面的自动 MS/MS 分析,由于离线点样而不受时间限制,将让您比在线模式更深入地了解样品。分离/制备的信息被传到 MALDI-TOF 质谱仪。可以使用一个 MALDI 靶板分析多个 LC 运行( 取决于使用 AnchorChip 靶板的类型和点样组分数量 )。

应用

spotOn

大量 LC-Top-Down 的 质谱序列确认 NISTmAb 参考材料 8671

MALDI-TOF Top-Down( TDS )可作为正交方法,用于获得来自 NISTmAb 库 IdeS 片段的扩展序列信息,以验证每个序列的大部分,同时提供有关 N- 和 C- 端的修饰和截断的可靠信息。

对于 NISTmAb 库中的 LC-MALDI-TDS 分析,可以使用大幅简化的增强工作流程,由 nanoElute® 以及新的 spotOn® 组分收集器、rapifleX® MALDI-TOF/TOF 质谱仪和 BioPharma Compass® 软件中的专用工作流程。

末端序列高达 70-90 的残基可以常规确认,此处用于验证单个谱图中的大部分序列( 70-85% )。对于LC,确认所有三个互补决定区域( CDR ),检测到 Fd 的 N- 端焦谷氨酸化、Fc/2 的糖基化和 C- 端 赖氨酸消除。类似的结果突出了 LC-MALDI-TDS 在 Top-Down 蛋白质序列确认方面的独特能力,包括对更多商品化单抗制品的分析,在 Top-Down 蛋白质组学联合会组织的最近对比研究中获得。

MALDI-TDS 方法在确定蛋白质缺失变异方面非常有效,并提供足够高质量的数据,用于对完全未知序列的测序分析。

Fd 片段的 MALDI-TDS 分析。序列覆盖率达到 61%,序列验证覆盖率达到 72%,3 个 CDR 中 2 个被分析确认。顶端面板验证了 Fd 的 N-端被焦谷氨酸化 - 未修饰的 N-端序列未得到证实。

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