高效液相色谱( HPLC )反相柱对样品的分离程度至关重要,在蛋白质组学研究中,精确分离样品可以帮助提升分析流程的质量。
科学家、研究人员和临床医生希望他们的高效液相色谱和质谱联用系统具有稳定性、高扫描速度和灵敏度,此时他们希望拥有一个能以最小的维护成本检测大量样本的系统。优化过程的关键从色谱柱开始,选择合适的色谱柱将有助于采集准确、可重复的数据,同时能提供更高的检测通量和超高灵敏度。
这就是色谱柱和喷针的关键所在:
(a) 高效连接液相色谱和质谱
(b) 多肽保留在活性位点
(c) 色谱分离度
在本期节目中,布鲁克质谱成像高级市场经理 Kate Stumpo 博士与加州大学旧金山分校( UCSF )著名 Zaro 实验室中被誉为 " 样品女王 " 的 Balyn Zaro 教授进行了交谈。了解了更多关于 Balyn 经历背后的故事,揭开蛋白质组学的另一层面纱—样品制备的关键作用。
拥有不同长度、内径和粒径组合的 C18 纳升色谱柱,PepSep® 可完美适配各种不同的蛋白质组学应用。
PepSep® 色谱柱使用行业领先的材料精心制作,使用分体式连接,以适应所有色谱需求。通过简单的拧紧和拧松的设计,可轻松地将色谱柱连接到纳升离子源。
使用更少的时间安装和更换色谱柱,把更多的时间花在您重要的事情上。使用 PepSep® 搭载 timsTOF 系列质谱仪并与 Bruker ProteoScape™ 软件相结合,增强您以 PASEF® 速度获取数据的能力,提升您的体验。
“ 我们对 PepSep 色谱柱的性能感到非常惊讶,这对于我们实现卓越的高通量蛋白质组学研究是不可或缺的。
与我们的布鲁克 timsTOF Pro 质谱无缝配合,PepSep 色谱柱使我们能够在使用更高的流速时拥有更低的背压。这意味着拥有更快的分析速度和更高的样品通量。”
David Gómez-Varela, Ph.D., Division of Pharmacology and Toxicology, University of Vienna, Vienna, Austria
新一代色谱柱为前沿蛋白质组学提供优越的灵敏度和分辨率。
关键性能
采用 PepSep® Advanced 色谱柱(25 cm × 75 um × 1.5 um)和竞争对手 A 色谱柱(一体柱,25 cm × 75 um × 1.7 um),从 0.25、1、4、16 ng HeLa 胰蛋白酶消化液中鉴定出的独特肽和蛋白质组。使用 nanoElute® 2 液相和 Bruker timsTOF Ultra 2 质谱,dia-PASEF® 采集模式。使用 DIA-NN 1.8.1 进行数据分析。
使用 PepSep® Advanced 色谱柱(25 cm x 75 um x 1.5 um),22 分钟有效梯度,不同进样量的 K562 中鉴定到的蛋白质组结果。使用 nanoElute® 2 液相和布鲁克 timsUltra AIP 质谱,dia-PASEF® 采集模式。使用 DIA-NN 1.8.1 基于 K562 谱图库进行数据分析
Biognosys iRT 试剂盒标准肽(1 uL 进样量,母液稀释 300 倍)使用 PepSep® Advanced 色谱柱(25 cm × 75 um × 1.5 um)分离的保留时间和峰宽,使用 nanoElute® 2 和 timsTOF Ultra,22 分钟有效梯度。
"新的 PepSep 色谱柱已被证明是稳健的,并且持续提供可重复的色谱结果。它具有更尖锐,更对称的峰,没有可观察到的拖尾,带来 7-8% 的鉴定提升。结合可便捷更换的喷针和有竞争力的价格,我们会优先考虑使用 PepSep 色谱柱。它实现了真正的即插即用。"
Lynn Spruce, Technical Director, CHOP-Penn Proteomic Core Facility, Philadelphia, USA
可靠和通用的色谱柱设计用于常规蛋白质组分析。
关键性能
Benefit | Application | Part No. | Description | Flow rate [nL/min] |
---|---|---|---|---|
Sensitivity | Single Cell Proteomics, Immunopeptidomics, General Proteomics, High Sensitivity | 1893627 | 25 cm x 50 µm x 1.5 µm | 50 - 200 |
Sensitivity | Single Cell Proteomics, Immunopeptidomics, General Proteomics, High Sensitivity | 1893625 | 15 cm x 75 µm x 1.5 µm | 150 - 750 |
Sensitivity | Single Cell Proteomics, Immunopeptidomics, General Proteomics, High Sensitivity | 1893626 | 15 cm x 50 µm x 1.5 µm | 50 - 300 |
Sensitivity | Single Cell Proteomics, Immunopeptidomics, General Proteomics, High Sensitivity | 1895803 | 10 cm x 75 µm x 1.5 µm | 150 - 1000 |
Sensitivity | Single Cell Proteomics, Immunopeptidomics, General Proteomics | 1893477 | 25 cm x 75 µm x 1.9 µm | 100 - 600 |
Sensitivity | Single Cell Proteomics, Immunopeptidomics, General Proteomics | 1893473 | 15 cm x 75 µm x 1.9 µm | 200 - 1000 |
Sensitivity | Single Cell Proteomics, Immunopeptidomics, General Proteomics | 1893472 | 10 cm x 75 µm x 1.9 µm | 150 - 1500 |
Optimization | General Proteomics, Plasma Proteomics, Mixed Samples, Gradient Versatility | 1895838 | 40 cm x 150 µm x 1.5 µm | 500 - 1000 |
Optimization | General Proteomics, Plasma Proteomics, Mixed Samples, Gradient Versatility | 1893479 | 25 cm x 150 µm x 1.9 µm | 500 - 2000 |
Optimization | General Proteomics, Plasma Proteomics, Mixed Samples, Gradient Versatility | 1893471 | 15 cm x 150 µm x 1.9 µm | 500 - 2000 |
Optimization | General Proteomics, Plasma Proteomics, Mixed Samples, Gradient Versatility | 1893474 | 15 cm x 150 µm x 1.5 µm | 500 - 1500 |
Throughput | General Proteomics, Plasma Proteomics, Mixed Samples, Gradient Versatility, High-Throughput | 1893470 | 8 cm x 150 µm x 1.5 µm | 500 - 5000 |
Throughput | General Proteomics, Plasma Proteomics, Mixed Samples, Gradient Versatility, High-Throughput | 1895619 | 4 cm x 150 µm x 1.9 µm | 500 - 5000 |
在基于质谱的蛋白质组学研究中,谱图库的建立对于鉴定和分析具有非常重要的影响。PepSep® Classic( 50 cm x 75 µm x 1.5 µm)色谱柱专为长梯度分析而设计,用于生成最终的谱图库。
专注于高通量分析的 PepSep® Classic 5 cm x 150 μm x 1.5 μm,分析梯度可少于 15 分钟,是临床样品分析或药物分子库筛查等追求分析速度应用场景的不二选择。
选择合适的色谱柱可以提高蛋白质和肽段的鉴定数量。 PepSep® Classic 25 cm x 75 μm x 1.5 μm C18 色谱柱能够从常规样品到极微量样品中分析到更多的蛋白质和肽段。
选择合适的色谱柱可以提高蛋白质和肽段的鉴定数量。PepSep® Classic 25 cm x 75 μm x 1.5 μm C18 色谱柱能够从常规样品到受限样品中分析到更多的蛋白质和肽段。
PepSep® Classic 25 cm x 150 μm x 1.5 μm C18 高效液相色谱柱将成为您的最佳方案,您将不用在短梯度和高通量之间做出取舍。是时候用更好的覆盖度、通量、灵敏度和重现性来提升您的蛋白质组学分析流程了。将 PepSep® Classic 25 cm x 150 μm x 1.5 μm 色谱柱与 timsTOF Pro 2 联用,可以展现出前所未有的蛋白质组学鉴定深度 —— 在 30 分钟梯度中,可以鉴定到超过 5500 个蛋白质,42000 个肽段。
“我一直使用自己填的柱子已经有 15 年,直到我开始接触 PepSep 柱子。PepSep 在性能方面确实很出色,远超我自己的自填柱,因此我毫无顾虑地选择使用 PepSep。”
Brett S Phinney Ph.D., Proteomics Core Director University of California, Davis
为了更深入挖掘血浆蛋白质组的信息,科学家们会对分析方法进行优化,以实现更深的覆盖度和更高的通量。
PepSep® Classic 10 cm x 150 μm x 1.5 μm 色谱柱可以提高仪器的性能,有助于提升您的分析。当与 timsTOF HT 联用,可以实现在 PASEF® 扫描速度下稳定分析 1000 例样本的高通量 4D-蛋白质组学。
蛋白质组学研究领域需要更高通量来获取有意义的数据,而 PepSep® Classic 10 cm x 150 μm x 1.5 μm 色谱柱就能帮助您实现这一目标,进一步提高您 HPLC 的分析能力。
鉴定、表征和定量肽段和蛋白质。具有优秀的重复性,同时比之前的色谱柱寿命更长。
“ 起初,我们只是在布鲁克 timsTOF Pro 质谱仪上使用 PepSep 色谱柱,但是我们对它们的性能和实惠的价格印象深刻,现在我们在实验室的所有仪器上使用 PepSep 色谱柱。
这些色谱柱真正达到了一流的分析效果。与传统的纳升流色谱柱相比,我们能够使用更高的流速,并将液相色谱的分离时间降至最低;这对结果产出至关重要,特别是在使用较短梯度分析数千个样本时。”
Danielle Swaney, Assistant Professor, Cellular Molecular Pharmacology, University of California, San Francisco, USA
即插即用的喷雾针配备了与色谱柱连接的接头和喷针,便于轻松进行 CaptiveSpray 设置。
PepSep 喷雾针有两个尺寸可供选择,可满足蛋白质组学应用的独特需求。与所有 CaptiveSpray 源兼容。