高速液体クロマトグラフィー(HPLC)に使用する逆相カラムはピーク分離能を決定する重要な構成要素です。なかでもプロテオミクスの世界では高精度分離こそが高品質な分析を導きます。
科学者、研究者、そして臨床医はHPLCおよび質量分析(MS)システムに堅牢性、スピード、および感度を求めています。彼らの要求は、クロマトグラフィー分離において最小限のメンテナンスで大規模なサンプル量に対応できるシステムを持つ場合にあてはまります。プロセスを最適化する鍵はカラムの選択から始まります。最適なカラムを使えば高いスループットと超高感度を維持しながら正確なデータを収集でき、かつ再現性の高い結果が得られます。
そこで重要になるのが、カラムおよびヒントです。
(a) 液体クロマトグラフィー(LC)とMSの橋渡し役
(b) ペプチドの保持/活性部位への結合
(c) クロマトグラフィーの分離能
Dr.Balyn Zaro が PepSep などについて語る omg OMx Podcast をぜひご視聴ください。
PepSepTM C18カラムは、スピード、再現性、および感度を重視するアカデミックおよびコアラボで御愛用いただいているカラムです。なぜならばこのカラムはねじ込むだけで簡単に取り付けおよび取り外しが可能なデザインしたからです。
その結果、カラム交換に費やす時間を減らし重要なことに費やす時間を増やせます。PepSepTM の消耗品とBruker ProteoScapeTM を搭載したtimsTOFシリーズを組み合わせることで、PASEF® の高速スキャンでデータを取得する能力が強化され、経験値が向上します。
" PepSepカラムの性能には本当に驚かされます。PepSepカラムは、驚くべきハイスループットなプロテオミクスを達成するために不可欠なものとなりました。
ブルカー timsTOF Pro質量分析計とシームレスに連携するPepSepカラムは、バックプレッシャーを最小限に抑えながら、より高いナノ流量で分析することを可能にします。これは分析時間の短縮とサンプルスループットの大幅な向上につながります。"
David Gómez-Varela, Ph.D., Division of Pharmacology and Toxicology, University of Vienna, Vienna, Austria
Advanced columns delivering superior sensitivity and resolution for cutting-edge proteomics.
Key Features
Identified unique peptide and protein groups, from 0.25, 1, 4 and 16 ng HeLa Tryptic Digest injection on an PepSep® Advanced column (25 cm x 75 µm x 1.5 µm) and Competitor A Column (pulled tip column, 25 cm x 75 µm x 1.7 µm). Samples were run on a nanoElute® 2 coupled to a Bruker timsTOF Ultra 2, dia-PASEF® acquisition. Data analysed using DIA-NN 1.8.1.
Identified unique protein groups, from various amounts of K562 injections on an PepSep® Advanced column (25 cm x 75 µm x 1.5 µm) using a 22 min active gradient. Samples were run on a nanoElute® 2 coupled to a Bruker timsUltra AIP, dia-PASEF® acquisition. Data analysed using DIA-NN 1.8.1 and K562 lib-based.
Retention times and peak widths of Biognosys iRT Kit peptides (1 µL injection volume, 1/300 dilution of stock solution) on a PepSep® Advanced column (25 cm x 75 µm x 1.5 µm) coupled to nanoElute® 2 and timsTOF Ultra, using a 22-minute active gradient.
"The new PepSep column has proven to be robust and consistently delivers reproducible chromatography. It produces sharper, more symmetrical peaks with no observable tailing, resulting in a 7–8% increase in identifications. Combined with the convenience of interchangeable emitters and competitive pricing, it has become our go-to column. It’s essentially plug-and-play."
Lynn Spruce, Technical Director, CHOP-Penn Proteomic Core Facility, Philadelphia, USA
Reliable and versatile columns designed for routine proteomic analyses.
Key Features
Benefit | Application | Part No. | Description | Flow rate [nL/min] |
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Sensitivity | Single Cell Proteomics, Immunopeptidomics, General Proteomics, High Sensitivity | 1893627 | 25 cm x 50 µm x 1.5 µm | 50 - 200 |
Sensitivity | Single Cell Proteomics, Immunopeptidomics, General Proteomics, High Sensitivity | 1893625 | 15 cm x 75 µm x 1.5 µm | 150 - 750 |
Sensitivity | Single Cell Proteomics, Immunopeptidomics, General Proteomics, High Sensitivity | 1893626 | 15 cm x 50 µm x 1.5 µm | 50 - 300 |
Sensitivity | Single Cell Proteomics, Immunopeptidomics, General Proteomics, High Sensitivity | 1895803 | 10 cm x 75 µm x 1.5 µm | 150 - 1000 |
Sensitivity | Single Cell Proteomics, Immunopeptidomics, General Proteomics | 1893477 | 25 cm x 75 µm x 1.9 µm | 100 - 600 |
Sensitivity | Single Cell Proteomics, Immunopeptidomics, General Proteomics | 1893473 | 15 cm x 75 µm x 1.9 µm | 200 - 1000 |
Sensitivity | Single Cell Proteomics, Immunopeptidomics, General Proteomics | 1893472 | 10 cm x 75 µm x 1.9 µm | 150 - 1500 |
Optimization | General Proteomics, Plasma Proteomics, Mixed Samples, Gradient Versatility | 1895838 | 40 cm x 150 µm x 1.5 µm | 500 - 1000 |
Optimization | General Proteomics, Plasma Proteomics, Mixed Samples, Gradient Versatility | 1893479 | 25 cm x 150 µm x 1.9 µm | 500 - 2000 |
Optimization | General Proteomics, Plasma Proteomics, Mixed Samples, Gradient Versatility | 1893471 | 15 cm x 150 µm x 1.9 µm | 500 - 2000 |
Optimization | General Proteomics, Plasma Proteomics, Mixed Samples, Gradient Versatility | 1893474 | 15 cm x 150 µm x 1.5 µm | 500 - 1500 |
Throughput | General Proteomics, Plasma Proteomics, Mixed Samples, Gradient Versatility, High-Throughput | 1893470 | 8 cm x 150 µm x 1.5 µm | 500 - 5000 |
Throughput | General Proteomics, Plasma Proteomics, Mixed Samples, Gradient Versatility, High-Throughput | 1895619 | 4 cm x 150 µm x 1.9 µm | 500 - 5000 |
PepSep® Classic 50 cm x 75 μm x 1.5 μm スペクトルライブラリー作成に不可欠なロンググラジエント用に設計されています。スペクトルライブラリーは、プロテオミクス、特に質量分析ベースのプロテオミクスにおいて重要な役割を果たします。
ハイスループットなプロテオミクス用に設計されたPepSep® Classic(5 cm x 150 µm x 1.5 µm)は、15分未満のグラジエントが可能です。このため、臨床サンプルの分析や薬剤ライブラリーのスクリーニングなど、スピードが要求されるアプリケーションに最適です。
適切な正しいカラムの選択は容易なことではありません。タンパク質やペプチドの同定数を上げるためには、カラムを選択する決断があります。PepSep® Classic(25cm x 75μm x 1.5μm)C18 HPLCカラムは、ルーチン分析から制限があるサンプルにわたり、高いタンパク質およびペプチドの同定数を実現します。
コアラボやアカデミックラボでは、より深いカバレッジ、より高いスループット、そしてより優れた同定数を実現するために、あらゆるアプリケーションに対応する単一のカラムソリューションを求めています。
PepSep® Classic(25 cm x 150 µm x 1.5 µm)は、装置性能の向上に貢献し、PASEF® 高速スキャンスピードでのサンプルスループットと高い4D感度の両方を自由に実現し、未知の領域を深く掘り下げ、プラズマプロテオームの可能性を切り開くことを可能にします。
PepSep XTREME C18 HPLCカラムは、短いグラジエントと高いスループットのどちらかを選択するのではなく両方とも提供します。より優れたカバレッジ、高スループット、高感度、高い再現性でプロテオミクス分析を向上させる時が来ました。PepSep XTREMEとtimsTOF Pro 2を組み合わせると30分のグラジエントで5,500以上のタンパク質グループ、42,000以上のペプチドという、これまでにない高深度プロテオミクスを実現できます。
科学者たちは、血漿プロテオームの解析において、より広いカバレッジとより高いスループットを達成するために、手法の微調整に時間を費やしています。
PepSep® Classic 10 cm x 150 µm x 1.5 µmは、装置性能を向上させ、分析を促進します。timsTOF HTと組み合わせることで、4D-プロテオミクスに専念し、PASEF® のスピードでハイスループットに1000サンプルを正確に分析することができます
プロテオミクスでは、価値のある豊富な意味のある豊富なデータを取得するためにハイスループットが要求されます。PepSep® Classic 10 cm x 150 μm x 1.5 μm カラムは、そのためのお手伝いをします。今こそHPLCの能力を向上させる時です。
PepSep ULTRAカラムはペプチドやタンパク質の同定、特性解析、そして定量を行います。優れた再現性を持ち、一般的な主要なカラムと比較してを最大2倍またはそれ以上長持ちさせることができます。
" 当初は、Bruker timsTOF Pro質量分析計のみにPepSepカラムを使用していました。しかしその性能と手頃な価格に感心し今ではラボのすべての装置でPepSepカラムを使用しています。
このカラムは、最高のクロマトグラフィーでありながら、背圧を最小限に抑えるというスイートスポットを見事に突いています。従来のナノスプレーカラムと比較すると、より高い流速で使用でき、LCのオーバーヘッド時間を最小にできます。これはスループット、特に短いグラディエントを用いた数千のサンプル処理に極めて重要なことでした。 "
Danielle Swaney, Assistant Professor, Cellular Molecular Pharmacology, University of California, San Francisco, USA
プラグ・アンド・プレイですぐに使用できるエミッターには、カラム接続用ユニオンとスプレー用チップが付属しており、CaptiveSprayのセットアップに手間がかかりません。
PepSep™エミッターは、2つのIDが用意されており、プロテオミクスアプリケーション特有の要求に対応します。すべてのCaptiveSprayソースと互換性があります。
研究用にのみ使用できます。臨床診断には使用できません。